Ответ:
Есть несколько шагов, чтобы сделать это, пожалуйста, игнорируйте мой плохой английский, я надеюсь, вы все еще можете понять процесс.
Объяснение:
Это не так сложно, как вы думаете.
Допустим, мы хотим изолировать ДНК из тимуса теленка, вам нужно следовать этим инструкциям (насколько я знаю, они одинаковы для яблока, но есть небольшие изменения):
-
Возьмите 3 куска по 3 грамма и порежьте его на крошечные кусочки, как можно меньше.
-
Поместите его в блендер с 75 мл солевого раствора цитрата натрия (SSC) на кусочек и убедитесь, что лезвие блендера полностью покрыто SSC, поэтому добавьте кусочек тимуса, если вам нужно.
SSC гарантирует, что клеточные мембраны растворяются.
Продолжайте смешивать, пока все не станет гладким.
-
Поместите его в пробирку для центрифуги и замените его другой пробиркой, чтобы центрифуга не сломалась
-
Поместите пробирку в центрифугу на 20 минут при 5000 об / мин.
-
Когда вы достанете пробирки из центрифуги, вы увидите, что там находятся два компонента. У основания есть твердое вещество, это называют лепешкой, и это держит ядра клетки с ДНК. Вы также увидите жидкое вещество, которое называется супернатант и состоит из SSC с растворенными клеточными мембранами.
-
Вылейте супернатант одним движением жидкости, это называется декантированием, и это оставляет вас с осадком.
-
Поместите небольшое количество 2,2 М NaCl в пробирку с шариком, чтобы шарик просто покрыли NaCl. NaCl вызывает осаждение белков, окружающих ДНК.
-
Размешайте его пустой пробиркой или перемешивающим стержнем. В конце концов вы должны получить два компонента. Белки внизу и вязкая жидкость сверху.
-
Выньте вязкую жидкость с помощью пипетки и убедитесь, что вы не принимаете протеины с вязкой жидкостью. (очень маленькие кусочки белка очень трудно избежать, но старайтесь избегать как можно большего количества белков)
-
Поместите вязкую жидкость, которую вы пипетировали в стакан, и добавьте в 2 раза больше этанола. Но добавьте этанол осторожно, потому что вы не хотите смешивать его с ДНК. На границе раздела между этанолом и вязкой жидкостью вы должны увидеть поднимающиеся пузырьки ДНК.
-
Аккуратно перемешайте стеклянным стержнем, ДНК заряжена отрицательно, поэтому она должна прилипать к стержню.
-
Положите его в пробирку и растворите в SSC.
Затем специальная машина может сказать вам, сколько ДНК вы изолировали и насколько она чиста.
Какие принципы испытаний используются для изучения передачи сигнала?
Изменения в транскрипции или трансляции генов, а также посттрансляционные и конформационные изменения в белках, а также изменения в их расположении. Передача сигнала - это процесс, посредством которого химический или физический сигнал передается через клетку в виде последовательности молекулярных событий. Изменения, вызванные связыванием лиганда (или восприятием сигнала) в рецепторе, приводят к возникновению сигнального каскада. На молекулярном уровне такие ответы включают изменения в транскрипции или трансляции генов, а также посттрансляционные и конформационные изменения белков, а также изменения их местоположения. Как и
Какие косвенные доказательства используют геологи для изучения строения Земли?
Изучены волны, вызванные землетрясением. Расплавленная часть ядра Земли ведет себя не так, как твердое тело, когда сталкивается с сейсмическими волнами. Это позволяет идентифицировать твердые и расплавленные зелья.
PBR322 представляет собой плазмиду, имеющую два сайта рестрикции для EcoRI, в то время как ДНК фага Т4 имеет три сайта рестрикции для нее. Эти две ДНК обрабатывали EcoRI и давали работать на агарозном геле. Какой рисунок будет получен на геле?
Неверный вопрос, T4 имеет около 40 сайтов для EcoR1, а не 3 ... pBR322 имеет только 1 сайт для EcoR1, между геном фактора устойчивости к AMP и геном TET-гена ... T4: (спасибо, Springer Verlag!) Изображение взято с http://link.springer.com/article/10.1007/BF00272920 © Springer-Verlag 1981 Но, если ваш вопрос более гипотетический: геномы pBR322 и T4 являются круглыми, поэтому: pBR322: 2cuts = 2 фрагменты, T4: 3cuts = 3 фрагмента. Работая на агарозном геле, вы увидите 2 полосы в полосе pBR, 3 полосы в полосе T4, если 2 или более фрагмента имеют одинаковый размер или близки к нему. , В этом случае они мигрируют более или