Как ученые выделяют ДНК для ее изучения?

Как ученые выделяют ДНК для ее изучения?
Anonim

Ответ:

Есть несколько шагов, чтобы сделать это, пожалуйста, игнорируйте мой плохой английский, я надеюсь, вы все еще можете понять процесс.

Объяснение:

Это не так сложно, как вы думаете.

Допустим, мы хотим изолировать ДНК из тимуса теленка, вам нужно следовать этим инструкциям (насколько я знаю, они одинаковы для яблока, но есть небольшие изменения):

  1. Возьмите 3 куска по 3 грамма и порежьте его на крошечные кусочки, как можно меньше.

  2. Поместите его в блендер с 75 мл солевого раствора цитрата натрия (SSC) на кусочек и убедитесь, что лезвие блендера полностью покрыто SSC, поэтому добавьте кусочек тимуса, если вам нужно.

    SSC гарантирует, что клеточные мембраны растворяются.

    Продолжайте смешивать, пока все не станет гладким.

  3. Поместите его в пробирку для центрифуги и замените его другой пробиркой, чтобы центрифуга не сломалась

  4. Поместите пробирку в центрифугу на 20 минут при 5000 об / мин.

  5. Когда вы достанете пробирки из центрифуги, вы увидите, что там находятся два компонента. У основания есть твердое вещество, это называют лепешкой, и это держит ядра клетки с ДНК. Вы также увидите жидкое вещество, которое называется супернатант и состоит из SSC с растворенными клеточными мембранами.

  6. Вылейте супернатант одним движением жидкости, это называется декантированием, и это оставляет вас с осадком.

  7. Поместите небольшое количество 2,2 М NaCl в пробирку с шариком, чтобы шарик просто покрыли NaCl. NaCl вызывает осаждение белков, окружающих ДНК.

  8. Размешайте его пустой пробиркой или перемешивающим стержнем. В конце концов вы должны получить два компонента. Белки внизу и вязкая жидкость сверху.

  9. Выньте вязкую жидкость с помощью пипетки и убедитесь, что вы не принимаете протеины с вязкой жидкостью. (очень маленькие кусочки белка очень трудно избежать, но старайтесь избегать как можно большего количества белков)

  10. Поместите вязкую жидкость, которую вы пипетировали в стакан, и добавьте в 2 раза больше этанола. Но добавьте этанол осторожно, потому что вы не хотите смешивать его с ДНК. На границе раздела между этанолом и вязкой жидкостью вы должны увидеть поднимающиеся пузырьки ДНК.

  11. Аккуратно перемешайте стеклянным стержнем, ДНК заряжена отрицательно, поэтому она должна прилипать к стержню.

  12. Положите его в пробирку и растворите в SSC.

Затем специальная машина может сказать вам, сколько ДНК вы изолировали и насколько она чиста.