Ответ:
Чтобы сохранить их нетронутыми …
Объяснение:
Ферменты рестрикции используются ОЧЕНЬ в небольших количествах, но обычно их покупают небольшими партиями.
Если не для чего иного, вы обычно предпочитаете делать разные тесты с той же партии. Поэтому приобретенная партия должна храниться в течение длительного времени.
Большинство ферментов в течение некоторого времени совершенно счастливы в своем буфере при 4 градусах Цельсия, но в конечном итоге они деградируют. 24 часа - это обычно принятый лимит.
Для более длительного хранения партия должна быть заморожена. -20С - это стандарт, и он будет держаться несколько месяцев. Для еще более длительных периодов (например, один или несколько лет) -70C является нормой.
Необходимо быстро заморозить его и в небольших контейнерах (например, Eppendorfs), чтобы избежать слишком частого оттаивания / повторного замораживания.
Чтобы избежать повреждения белка при таких низких температурах, можно / нужно добавлять стабилизаторы, такие как DTT (ди-тио-треитол), сывороточный альбумин и, что наиболее важно, глицерин (5-50%)
Как ни странно, при -20C необходимо использовать 50% глицерина, в то время как при -70 глицероле на самом деле нет необходимости, хотя его добавление может помочь стабилизировать белок ….
PBR322 представляет собой плазмиду, имеющую два сайта рестрикции для EcoRI, в то время как ДНК фага Т4 имеет три сайта рестрикции для нее. Эти две ДНК обрабатывали EcoRI и давали работать на агарозном геле. Какой рисунок будет получен на геле?
Неверный вопрос, T4 имеет около 40 сайтов для EcoR1, а не 3 ... pBR322 имеет только 1 сайт для EcoR1, между геном фактора устойчивости к AMP и геном TET-гена ... T4: (спасибо, Springer Verlag!) Изображение взято с http://link.springer.com/article/10.1007/BF00272920 © Springer-Verlag 1981 Но, если ваш вопрос более гипотетический: геномы pBR322 и T4 являются круглыми, поэтому: pBR322: 2cuts = 2 фрагменты, T4: 3cuts = 3 фрагмента. Работая на агарозном геле, вы увидите 2 полосы в полосе pBR, 3 полосы в полосе T4, если 2 или более фрагмента имеют одинаковый размер или близки к нему. , В этом случае они мигрируют более или
Почему ферменты рестрикции важны для дактилоскопии ДНК?
Ферменты рестрикции будут разрезать молекулу ДНК только по определенной схеме оснований. (как показано на рисунке) Поскольку все организмы (из независимых зигот) обладают уникальной ДНК, ферменты рестрикции будут разрезать ДНК в разных положениях и на разных частотах. Это приводит к разному количеству «кусков» различной длины / размеров. Полиморфизм длины рестрикционных фрагментов (RFLP) - это анализ фрагментов, полученных из данного рестриктазного фермента - фрагменты частично заряжены и будут реагировать на электрические поля. Фермент важен, потому что полученный «отпечаток» зависит от кусочков разрез
Почему ферменты рестрикции важны для технологии рекомбинантных ДНК?
Фермент рестрикции является основным инструментом рекомбинантного днк-технолога - все ферменты рестрикции инспектируют молекулу ДНК в ряду специфической последовательности распознавания. Как только он получает определенную последовательность распознавания, он связывается с сайтом и разрезает каждую из двух нитей двойной спирали в определенных точках путем гидролиза фосфодиэфирных связей. ФЕРМЕНТЫ ОГРАНИЧЕНИЯ ПРИЗЫВАЮТСЯ КАК МОЛЕКУЛЯРНЫЕ НОЖНИЦЫ.